बोन मैरो-डिराइव्ड मैक्रोफेज
बोन-मैरो-डिराइव्ड मैक्रोफेज (BMDM) उन मैक्रोफेज कोशिकाओं को संदर्भित करता है जिन्हें स्तनधारी अस्थि मज्जा (बोन मैरो) कोशिकाओं से अनुसंधान प्रयोगशाला में उत्पन्न किया जाता है।[1] BMDM, ग्रोथ फैक्टर (विकास कारक) और अन्य सिग्नलिंग अणुओं की उपस्थिति में परिपक्व मैक्रोफेज में विभेदित हो सकते हैं। अविभेदित अस्थि मज्जा कोशिकाओं को मैक्रोफेज कॉलोनी-स्टिम्युलेटिंग फैक्टर (M-CSF; CSF-1) की उपस्थिति में संवर्धित (culture) किया जाता है। M-CSF एक साइटोकाइन और विकास कारक है जो माइलॉयड प्रोजेनिटर (पूर्वज कोशिकाओं) के मोनोसाइट्स (जो बाद में मैक्रोफेज में परिपक्व होते हैं) में प्रसार और प्रतिबद्धता के लिए जिम्मेदार है। शरीर में मैक्रोफेज के कई प्रकार के कार्य होते हैं, जिनमें बाहरी आक्रमणकारियों और अन्य कोशिकीय मलबे का फैगोसाइटोसिस (भक्षण), प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को ट्रिगर करने के लिए साइटोकाइन जारी करना, और एंटीजन प्रस्तुति शामिल है। BMDM मैक्रोफेज की एक बड़ी सजातीय आबादी प्रदान करते हैं जो मैक्रोफेज-संबंधित अनुसंधान को संभव और आर्थिक रूप से व्यवहार्य बनाने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।
उत्पादन
BMDM का उत्पादन करने के लिए, चूहों की टिबिया या फीमर से हेमेटोपोएटिक स्टेम कोशिकाएं निकाली जाती हैं। चूंकि BMDM अस्थि मज्जा से प्राप्त होते हैं, इसलिए निकाली गई कोशिकाएं स्वस्थ और भोली (या असक्रिय) होती हैं, चाहे दाता चूहों की स्थिति कुछ भी हो। हटाने के बाद, स्टेम-कोशिकाओं को CSF-1 के साथ इनक्यूबेट किया जाता है। CSF-1 के बिना, कोशिकाएं एक निष्क्रिय अवस्था में प्रवेश कर जाती हैं लेकिन यदि बाद में उत्तेजित किया जाए तो वे विकास और विभेदन को फिर से शुरू कर सकती हैं। परिपक्व मैक्रोफेज और फाइब्रोब्लास्ट, जिनमें अवांछित विकास कारक हो सकते हैं, को हटा दिया जाता है। इसके बाद, उपज बढ़ाने और तेजी से टर्मिनल विभेदन को बढ़ावा देने के लिए अक्सर IL-3 और IL-1, दो विकास कारक, जोड़े जाते हैं। कोशिकाओं को लगातार व्यवहार्य बनाए रखने के लिए विकास कारकों और अन्य सीरम युक्त एक्सोजेनस मीडिया को भी जोड़ा जाना चाहिए। पूर्ण विकास और विभेदन में लगभग 5-8 दिन लगते हैं।
लाखों BMDM एक चूहे से प्राप्त किए जा सकते हैं और वर्षों तक जमे हुए (frozen) रखे जा सकते हैं। पिघलाए जाने के बाद BMDM विभिन्न प्रकार के उत्तेजकों जैसे LPS, IFN-γ, PAMPs, NF-κB, और IRF3 के प्रति प्रतिक्रिया कर सकते हैं।[1] ये संकेत उन जीनों के अनुवाद को प्रेरित करते हैं जो साइटोकाइन का उत्पादन करते हैं और यह निर्धारित करते हैं कि मैक्रोफेज M1 (प्रो-इंफ्लेमेटरी) हैं या M2 (एंटी-इंफ्लेमेटरी)। यदि BMDM को फ्रीज नहीं किया जाता है, तो वे पुराने हो जाते हैं और उनकी व्यवहार्यता कम हो जाती है क्योंकि उनके मीडिया में CSF-1 और विकास कारक कम हो जाते हैं।
BMDM के प्रसार को कई अभिकर्मकों द्वारा भी बाधित किया जा सकता है।[2] उदाहरण के लिए, विकास और विभेदन CSF-1 और एक कार्यात्मक CSF-1 रिसेप्टर पर निर्भर है, जो टायरोसिन काइनेज परिवार का एक सदस्य है। कार्यात्मक CSF-1 रिसेप्टर्स के बिना, स्टेम कोशिकाएं CSF-1 उत्तेजनाओं के प्रति प्रतिक्रिया नहीं कर सकती हैं और इसलिए विभेदित नहीं हो सकती हैं; इंटरफेरॉन CSF-1 रिसेप्टर के डाउन रेगुलेशन का कारण बन सकते हैं। इसके अतिरिक्त, मैक्रोफेज परिपक्वता को M1 या M2 में प्रेरित करने के लिए LPS जैसे उत्तेजकों के बिना, चूहों में मोनोसाइट्स का एक बड़ा पूल जमा हो जाता है, जो मैक्रोफेज की पूर्ववर्ती कोशिकाएं हैं, जो मैक्रोफेज-विशिष्ट अनुसंधान के लिए कम सहायक होती हैं।
संदर्भ
- ↑ 1.0 1.1 (April 2015). "Bone marrow-derived macrophages from aged rats are more responsive to inflammatory stimuli". Journal of Neuroinflammation. 12 (1). doi:10.1186/s12974-015-0287-7.
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स्रोत: अंग्रेज़ी विकिपीडिया के “Bone marrow-derived macrophage” लेख का अनुवाद। मूल लेख: https://en.wikipedia.org/wiki/Bone_marrow-derived_macrophage यह अनुवाद स्वचालित रूप से तैयार किया गया है।
